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74.8一个63.7该怎么选择退火温度,还有要批的东西在1600bp以上,延伸时间该有多长啊[/font][/size],[size=2]
通常以连续与模板互补的碱基个数用以下公式计算:
Tm=(A+T)X2+(G+C)X4
然后再减5度
2015年11月11日发布人:PCR
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[size=2]引物退火温度50-60度,taq酶延伸温度72度,那么taq酶延伸的时候部分引物岂不是已经熔开?我也做过一些pcr,但没有想过这个问题,请各位高人帮忙解答。
我看到有人说引物Tm值不要超过72度,这是为什么呢,我觉得
2014年09月25日发布人:四福晋
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、TUNEL-POD、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(荧光素)、细胞凋亡过氧化物酶标记测定试剂盒(TUNEL)、生物素-dUTP酶标亲和素测定试剂盒(TUNEL)、同位素标记试剂盒(TUNEL)等等,不知道它们之间具体有什么不一样,可否告知一二
2015年06月10日发布人:嗅嗅
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针对原吸检测自来水中金属元素,塞曼扣背景与自吸收扣背景哪种较好,扣背景技术分为三种:塞曼扣背景、氘灯扣背景、自吸扣背景
整体上看:塞曼扣背景优点最多,适用于全波长,唯一的缺点是曲线向下翻转,线性范围小
氘灯扣背景:适用于300以下
2014年07月24日发布人:happydream
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[size=2]请问各位大虾PCR时TM是看TM(1M Na+)还是TM(0.05M Na+)?P时是不是将其降5-8度?目的基因P不出来只有二聚体出来,是不是引物没设计的好的原因?我该怎么办啊?[/size],[size=2]我也发现
2016年02月09日发布人:bongte
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孵育过夜,1:5000稀释二抗,洗膜用TBST洗两次每次15分钟,用TBS洗一次15分钟,曝光,加上ECL2分钟后整张膜发亮,未见条带放光,爆出来后内参和目的蛋白都有条带,但是背景很深,是怎么回事呢??谢谢~~[/b][/color
2013年07月26日发布人:jingling845
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[size=2]请问大家 引物的Tm值和退火温度之间有什么关系 如何选择引物的退火温度啊[/size],[size=2]
退火温度一般是引物的Tm值减去5[/size],[size=2]Tm值减去3-5度[/size],[size=2
2014年09月01日发布人:sistis
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[/font][/color][/size],[size=2][color=Black][font=黑体]每次整个膜都是亮的, 抗体稀释后整个膜也是亮的 就是暗一些. 不知道再该怎么办来降低背景. 感觉下面actin的杂带比目的蛋白的带还要深
2013年07月17日发布人:summerxx
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要检测成骨细胞经药物作用后的ALP活性,应用南京建成的ALP检测试剂盒,但不知道是检测细胞培养液中的ALP还是细胞裂解后的ALP活性?亟待回答!Smile[/size],[size=2]
当然是裂解后的。我也正准备做
2015年11月14日发布人:冰儿0109
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[color=Black][size=2]各位战友,
最近作western,背景非常高,改变了几个条件,还是不行。
请大家会诊一下。
另外,大家是否碰到过这样的问题?都是如何处理的?
我注意到本版关于背景深的问题有不少战友提出
2013年06月04日发布人:zhihui小新